Тест основан на способности зрелых форм сперматозоидов связываться с гиалуронатом-компонентом кумулюсных клеток и фолликулярной жидкости.
Для процессов естественного оплодотворения и стандартного оплодотворения in vitro необходимо, чтобы сперматозоид распознал и проник через вязкие слои кумулюса и зону пеллюцида к ооциту. Гиалуронат — высокомолекулярный мукополисахарид — главный компонент кумулюса, окружающего ооцит и зону пеллюцида. Сперма содержит по крайней мере два специфических гиалуронат-связанных белка, один из которых участвует в проникновении сперматозоида в кумулюс.
Если нормальные сперматозоиды сталкиваются с гиалуронатом, то происходит их химическое связывание. Связанные сперматозоиды легко отличимы от несвязанных, так как их головки не совершают прогрессивного движения, а хвосты двигаются. Внешне такие сперматозоиды схожи с теми, кто прошел кумулюс и прикрепился к зоне пеллюцида. Однако, не все сперматозоиды способны к связыванию с гиалуронатом. Исследование показало, что способность связываться с гиалуронатом приобретается в процессе созревания сперматозоида. Незрелые формы сперматозоидов не способны связаться с гиалуронатом. Таким образом, способность связываться с гиалуронатом — индикатор зрелости сперматозоида.
